等溫滴定微量熱儀是如何工作的？

   等溫滴定量熱儀（Isothermal Titration Calorimetry, ITC）是一種研究分子間相互作用的非標(biāo)記技術(shù)（Label-Free Technique），它通過檢測分子間相互作用過程中由于價鍵形成或者打開而造成的放熱或者吸收現(xiàn)象來計算分子間相互作用的定性和定量信息，包括作用有無結(jié)合、結(jié)合強(qiáng)弱（親和力），結(jié)合比例（化學(xué)計量比），作用機(jī)制（ΔH, ΔS和ΔG等），酶促動力學(xué)（Km, Ki, kcat）等等。

   等溫滴定量熱儀主要由隔熱夾套包裹著的樣品池、參比池、注射器和計算機(jī)組成，注射器同時具有攪拌作用，計算機(jī)控制溫度控制裝置和信息反饋系統(tǒng)。恒溫條件下當(dāng)?shù)味ㄟM(jìn)行前，首先反饋系統(tǒng)給樣品池一個連續(xù)的能量確定基線。滴定進(jìn)行時，注射器滴入反應(yīng)物與樣品池中被滴定物相互作用反應(yīng)，形成復(fù)合物。復(fù)合物的形成伴隨著能量的釋放或吸收，導(dǎo)致樣品池溫度的變化，參比池始終保持在實(shí)驗(yàn)溫度，反饋系統(tǒng)提供熱或降低熱量來補(bǔ)償樣品池的溫度變化，每注射一次后系統(tǒng)恢復(fù)至平衡狀態(tài)再進(jìn)行下一滴滴定。結(jié)果以峰的形式表示平衡溫度偏移所需要的能量，峰的面積相當(dāng)于反應(yīng)釋放或吸收的熱量。隨著池中反應(yīng)趨于飽和，熱量信號逐漸減弱知道只看到背景熱量。最后將熱量進(jìn)行積分并運(yùn)用合適的結(jié)合模型得到親和力、化學(xué)計量比、和反應(yīng)焓變等。

   MicroCal PEAQ-ITC 是一款高靈敏度、低容量的等溫滴定微量熱儀，可用于生物分子相互作用的無標(biāo)記溶液內(nèi)研究。 它可以在單次實(shí)驗(yàn)中直接測量所有結(jié)合參數(shù)，并且可使用低至 10µg 容量的樣品對無論是高親和力還是低親和力的結(jié)合劑進(jìn)行分析。 半自動維護(hù)可減少操作人員的干預(yù)，系統(tǒng)可升級至全自動 MicroCal PEAQ-ITC Automated。